Иммунологическое обследование при онкологических заболеваниях

Это исследование включает в себя комплексную оценку субпопуляционного состава лимфоцитов (см. Иммунологическое обследование первичное), уровня циркулирующих иммунных комплексов, основных классов иммуноглобулинов периферической крови, а также упор сделан на расширенную оценку малых субпопуляций NK- и NK-T-клеток (Natural killers – "натуральные киллеры") , изменения со стороны которых косвенно отражают состояние противоопухолевого иммунитета. Наряду с этим проводится анализ Т-регуляторных клеток, связанных с развитием опухолевого процесса.

*Набор тестов:

Синонимы русские

Иммунограмма, иммунофенотипирование, клеточный иммунитет, многоцветный клеточный анализ методом проточной цитометрии.

Синонимы английские

Human Immune System, Immunophenotyping, Multicolor Flow Cytometry Cell Analysis, Human Leukocyte Differentiation Antigens.

Метод исследования

Проточная цитометрия.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как подготовиться к исследованию?

  • Исключить из рациона  алкоголь в течение 24 часов до исследования.
  • Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования.
  • Полностью исключить прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием (по согласованию с врачом).
  • Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования.
  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

В современном понимании иммунный статус человека – это совокупность лабораторных показателей, характеризующих ко­личественную и функциональную активность клеток иммунной системы в данный момент времени. Оценка иммунного статуса проводится с помощью иммунологического лабораторного обследования – иммунограммы. Иммунограмма крови не отража­ет избирательно состояние патологически измененного органа или системы, но позволяет оценить иммунную систему в целом (сум­марный эффект изменения активности иммунной системы в ответ на чужеродный антиген).

Определение клеточного состава (иммунофенотипирование) лимфоцитов крови – основной компонент в оценке иммунного статуса – выполняется методом проточной цитофлюориметрии.

Иммунофенотипирование – это характеристика клеток, полученная при помощи моноклональных антител или каких-либо других зондов, позволяющих судить об их типе и функциональном состоянии по наличию того или иного набора клеточных маркеров.

Иммунофенотипирование лейкоцитов заключается в обнаружении на их поверхности маркеров дифференциации, или CD-антигенов. Лейкоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития.

CD-антигены (англ. cluster of differentiation antigens) – это антигены на поверхности клеток, маркеры, отличающие одни типы клеток от других. Дифференциации этих антигенов изучены и стандартизованы, им присвоены определенные номера. CD могут быть распознаны с помощью соответствующих моноклональных антител. Используя флюоресцентно-меченые моноклональные антитела, связывающиеся с определенными CD, можно с помощью метода проточной цитометрии рассчитать содержание лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям.

В основе проточной цитофлюориметрии лежит фотометрическое и флюоресцентное измерение отдельных клеток, пересекающих одна за другой вместе с потоком жидкости луч монохроматического света, обычно света лазера.

Метод позволяет не только определить количественное соотношение основных популяций лимфоцитов –

  • Т-лимфоциты (CD3 CD19-),
  • Т-хелперы/индукторы (CD3 CD4 CD45 ),
  • Т-цитотоксические лимфоциты (Т-ЦТЛ) (CD3 CD8 CD45 ),
  • истинные натуральные киллеры (NK-клетки) (CD3-CD56 CD45 ),
  • В-лимфоциты (CD19 CD3-), –

но и оценить малые клеточные популяции, а также изучить их функциональную активность:

  • Т-лимфоциты, экспрессирующие маркеры NK-клеток (Т-NK-клетки) (CD3 CD56 CD45 ),
  • NK-клетки цитолитические (CD3-CD16 (orhigh) CD56dimCD45 ),
  • NK-клетки цитокинпродуцирующие (CD3-CD16-(orlow) CD56brightCD45 ),
  • NK-клетки, экспрессирующие альфа-цепь антигена CD8 (CD3-СD8 CD45 ),
  • активированные В-лимфоциты (CD3-CD25 CD45 ),
  • активированные Т-лимфоциты (CD3 HLA-DR CD45 ) и активированные цитотоксические лимфоциты (CD8 HLA-DR CD45 ),
  • В-лимфоциты и активированные NK-клетки (CD3-HLA-DR CD45 ),
  • активированные Т-лимфоциты, экспрессирующие альфа-цепь рецептора ИЛ-2 (CD3 CD25 CD45 ),
  • регуляторные Т-хелперные клетки (CD4 CD25brightCD127negCD45 ), выполняющие иммуносупрессорную функцию.

Такое всестороннее изучение клеточного состава лимфоцитов в совокупности с результатами других тестов, входящих в состав исследования, позволяет установить более тонкие

Что означают результаты?

Уровень различных клеточных популяций лимфоцитов может повышаться или понижаться при различных патологических процессах в организме, таких как инфекции, аутоиммунные и онкологические заболевания, иммунодефициты, в постоперационном периоде, при трансплантации органов.

Ниже представлена таблица с клиническими ситуациями, которые могут приводить к изменениям в субпопуляционном составе лимфоцитов.

Субпопуляция лимфоцитов

Повышение показателя

Снижение показателя

T-лимфоциты (CD3 CD19-)

- Острые и хронические инфекции

- Гормональный дисбаланс

- Длительный приём лекарственных препаратов (особенно монотерапия)

- Приём биологически активных добавок

- Интенсивные занятия спортом

- Беременность

- T-клеточные лейкозы

- Некоторые виды инфекций

- Иммунодефицитные состояния

- Алкогольный цирроз печени

- Карцинома печени

- Аутоиммунные заболевания

- Приём иммуносупрессивных препаратов

T-хелперы (CD3 CD4 CD45 )

- Ряд аутоиммунных заболеваний

- Гормональный дисбаланс

- Некоторые инфекции

- Отдельные T-клеточные инфекции

- Отравление солями бериллия

- Иммунодефицитн. состояния (основной лабораторный признак вторичного иммунодефицита)

- Алкогольная болезнь печени

- Аутоиммунные заболевания

- Приём иммуносупрессивных препаратов или приём стероидов

T-цитотоксические лимфоциты (CD3 CD8 CD45 )

- Некоторые вирусные инфекции

- Ряд T-клеточных лимфозов

- Наркоз

- Острая фаза аллергии

- Ряд аутоиммунных патологий

- Некоторые виды аутоиммунных, аллергических заболеваний

- Иммуносупрессивная терапия

Активированные T-лимфоциты (CD3 HLA-DR CD45 )

- Инфекции

- Аутоиммунная патология

- Аллергия

- Онкологические заболевания

- Алкогольный цирроз печени

- Беременность

Не имеет диагностического значения

B-лимфоциты (CD19 CD3-)

- Ряд аутоиммунных патологий

- Стресс

- B-клеточные лимфомы

- Длительное воздействие формальдегида

Гипореактивность, перераспределение B-лимфоцитов в очаги воспаления

Натуральные «киллеры» (CD3-CD56 CD45 ), (CD3-CD16 CD45 )

- Фаза восстановления после вирусных инфекций (гепатит B, C)

- Ряд аутоиммунных заболеваний

- Онкологические заболевания

- Беременность

- Алкогольный цирроз печени

- Ряд инфекций

- Ряд аутоиммунных заболеваний

- Курение

- Иммуносупрессивная терапия и терапия стероидами

T-натуральные «киллеры», НК-Т (CD3 CD56 CD45 )

- Длительные хронические воспалительные процессы

- Тяжёлое течение воспалительных процессов

- Длительная персистенция антигена в организме

Не имеет диагностического значения

B1-клетки (CD19 CD5 CD27-CD45 )

- Аутоиммунная патология (системная красная волчанка, ревматоидный артрит, аутоиммунный тиреоидит,  неспецифический язвенный колит, миастения)

- Аутоиммунные поражения при инфекционных заболеваниях (хламидиоз, синдром Рейтера, бруцеллёз)

- Лимфопролиферативные процессы

Не имеет диагностического значения

T-reg. (регуляторные T-клетки (CD4 CD25brightCD127negCD45 )

- Различные новообразования

- Лимфопролиферативные процессы

- Инфекционные заболевания

- Аутоиммунная патология (сахарный диабет 1-го типа, рассеянный склероз, ревматоидный артрит, аутоиммунный тиреоидит, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, миастения)

- Аллергические заболевания

(бронхиальная астма, атопический дерматит, пищевая аллергия)

К каждой иммунограмме прилагается письменное заключение врача-иммунолога.

Важные замечания

Для диагностики патологий результаты этого исследования необходимо сопоставлять с клиническими данными и показателями других лабораторных анализов. Также следует отметить, что клиническую значимость исследования существенно повышает оценка иммунологического статуса пациента в динамике.

Литература

  • Хаитов, Р. М. Аллергология и иммунология : национальное руководство / под ред. Р. М. Хаитова, Н. И. Ильиной. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 656 с.
  • Хаитов, Р. М. Руководство по клинической иммунологии. Диагностика заболеваний иммунной системы : руководство для врачей / Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин, А. А. Ярилин. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 352 с.
  • Зуева Е. Е. Иммунная система, иммунограмма : рекомендации по назначению и применению в лечебно диагностическом процессе / Е. Е Зуева, Е. Б. Русанова, А. В. Куртова, А. П. Рыжак, М. В. Горчакова, О. В. Галкина – СПб. – Тверь: ООО «Издательство «Триада», 2008. – 60 с.
  • Кетлинский, С. А. Иммунология для врача / С. А. Кетлинский, Н. М. Калинина. СПб. : Гиппократ, 1998. – 156 с. Ярилин, А. А . Иммунология : учебник / А. А. Ярилин. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 752 с.
  • Хаитов, Р. М. Иммунология : атлас / Р. М. Хаитов, А. А. Ярилин, Б. В. Пинегин.М. : ГЭОТАР-Медиа, 2011. – 624 с.
  • Хаитов, Р. М. Иммунология : учебник / Р.М. Хаитов. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 320 с.
  • Хаитов, Р. М. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии / Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин // Иммунология. – 2001. – N4. – С. 4-6.
  • Whiteside, T. L. Role of Human Natural Killer Cells in Health and disease / T. L. Whiteside, R. B. Herberman // Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. – 1994. – Vol. 1, №2. – P. 125-133.
  • Ginadi, L. Differential expression of T-cell antigens in normal peripheral blood lymphocytes : a quantitative analysis by flow cytometry / L. Ginadi, N. Farahat, E. Matutes [et al.] // J. Clin. Pathol. – 1996. – Vol. 49, № 1. – P. 539-544.
  • Merser, J.C. Natural killer T-cells : rapid responders controlling immunity and disease / J.C. Merser, M.J. Ragin, A. August // International J. Biochemistry & Cell Biology. – 2005. – № 37. – P. 1337-1343.
  • Никитин, В. Ю. Маркеры активации на Т-хелперах и цитотоксических лимфоцитах на различных стадиях хронического вирусного гепатита С / В. Ю. Никитин, И. А. Сухина, В. Н. Цыган [и др.] // Вестн. Рос. Воен.-мед. акад. – 2007. – Т. 17, № 1. – С. 65-71.
  • Boettler, T. T cells with CD4 CD25  regulatory phenotype suppress in vitro proliferation of virus-specific CD8  T cells during chronic hepatitis C virus infection / T. Boettler, H.C. Spangenberg, C. Neumann-Haefelin [et al.] // J. Virology. – 2005. – Vol. 79, N 12. – P. 7860-7867.
  • Ormandy, L.A. Increased Populations of Regulatory T Cells in Peripheral Blood of Patients with Hepatocellular Carcinoma / L.A. Ormandy, T. Hillemann, H. Wedemeyer [et al.] // J. Cancer Res. – 2005. –Vol. 65, N 6. – P. 2457-2464.
  • Sakaguchi, S. Naturally arising FoxP3-expressing CD4 CD25  regulatory T cells in immunological tolerance to self- and non-self / S. Sakaguchi // Nature Immunol. – 2005. – Vol. 6, N 4. – P. 345-352.
  • Romagnani, S. Regulation of the T cell response / S. Romagnani // Clin. Exp. Allergy. – 2006. – Vol. 36. – P. 1357-1366.
  • Хайдуков С. В., Основные и малые популяции лимфоцитов периферической крови человека и их нормативные значения (метод многоцветного цитометрического анализа) / Хайдуков С. В., Зурочка А. В., Тотолян А. А., Черешнев В. А. // Мед. иммунология. – 2009. – Т. 11 (2-3). - С. 227-238.