Human Herpes Virus 8, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Синонимы русскиеСинонимы английскиеМетод исследованияКакой биоматериал можно использовать для исследования?Как правильно подготовиться к исследованию?Что означают результаты?Важные замечанияЧто может влиять на результат?Также рекомендуетсяКто назначает исследование?Общая информация о заболевании

Исследование крови в целях обнаружения генетического материала (ДНК) вируса герпеса человека 8 типа (ВГЧ-8) с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (реал-тайм ПЦР).

Синонимы русские

Вирус герпеса человека 8-го типа, ВГЧ-8, РТ-ПЦР.

Синонимы английские

HHV-8, KSHV (Kaposhi Sarсoma Herpes Virus), DNA [Real-time PCR] (blood).

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до анализа.

Общая информация о заболевании

HHV-8 был открыт в 1994 г., он относится к подсемейству гамма-герпес-вирусов, роду радиновирусов.

В настоящее время считается, что он больше распространен в южных странах: в Африке, на Ближнем Востоке, в Южной Европе. В некоторых странах Африки ВГЧ-8 инфицировано от 32 до 100 % населения. В США он обнаруживается примерно у 10 % обследуемых. В Северной Америке и на территории стран СНГ вирус распространен умеренно.

По данным американских исследователей, 1-3 % доноров инфицировано ВГЧ-8. Он встречается у 30-50 % ВИЧ-положительных гомосексуалистов и у 15-20 % ВИЧ-отрицательных.

Для Российской Федерации эпидемиология ВГЧ-8 остается неизученной.

Заболевания, вызываемые вирусом:

  • саркома Капоши,
  • первичные лимфомы,
  • болезнь Кастлемана.

ВГЧ-8 обнаруживается прежде всего при саркоме Капоши, полостных лимфомах, мультицентрической болезни Кастлемана и при повреждениях кожи реципиентов.

Саркома Капоши (СК) – многоочаговая злокачественная опухоль сосудистого происхождения с преимущественным поражением кожных покровов и вовлечением внутренних органов и лимфатических узлов. Выделяют четыре различные эпидемиологические формы СК: классическая, африканская, ятрогенная и СПИД-ассоциированная. В свою очередь, ВГЧ-8 подразделяют на три варианта: А, В и С – на основании различий в нуклеотидных последовательностях вирусного генома.

Вариант А связывают с классической СК и со СПИД-ассоциированными поражениями кожи и внутренних органов, варианты  В и С – с лимфопролиферативными заболеваниями (лимфомами, генерализованными лимфаденопатиями, болезнью Кастлемана).

Первичная инфекция ВГЧ-8 протекает обычно бессимптомно. У иммунокомпетентных детей и взрослых первичная инфекция ВГЧ-8 редко встречается в регионах с низкой распространенностью ВГЧ-8, например в Соединенных Штатах Америки. Во многих африканских странах дети инфицируются часто. Описана первичная инфекция у детей в Египте в виде острого заболевания с лихорадкой, макуло-папулезной сыпью, фарингитом.

Клинические проявления реактивации ВГЧ-8-инфекции относятся в большинстве случаев к саркоме Капоши, которая развивается на фоне иммуносупрессии и выражается характерными сосудистыми, багровыми узелками, которые могут появиться на коже или в ротовой полости, болезнь также поражает легкие, желчевыводящую систему, другие органы.

Кроме того, ВГЧ-8-инфекция ассоциируется с другими заболеваниями, у большинства из которых причинная связь с ВГЧ-8 не подтверждается. Одно из таких заболеваний – множественная миелома (multiple myeloma); было выявлено, что HHV-8 вызывает размножение зараженных плазматических клеток. Другие ассоциации включают саркоидоз, кожную T-клеточную лимфому, базальную и сквамозно-клеточную карциному. Есть сообщения о том, что ВГЧ-8 может вызывать афебрильные заболевания, которые сопровождаются лимфаденопатией, анемией, тромбоцитопенией, гепатитом у иммунологически скомпрометированных больных.

Пути передачи ВГЧ-8

  • Половой путь. Исследователи находили вирус в сперме, прямой кишке, мочеиспускательном канале, секрете предстательной железы.
  • Неполовой путь: ученые из Вашингтонского университета (США) обнаружили, что у 60 % лиц с ВГЧ-8 вирус в больших количествах встречается в слюне, а также на слизистой ротовой полости и, по-видимому, передается при поцелуях.
  • Через кровь и ткани: заражение происходит при внутривенном употреблении наркотиков или пересадке органов и тканей. До настоящего времени не описано случаев заражения при переливании крови.
  • От матери к ребёнку: в 2001 году исследование, проведенное в Университете Небраски (Линкольн, США), показало, что ВГЧ-8 может передаваться вертикально – от матери к плоду. Однако риск такой передачи крайне низок. Из 89 обследованных матерей с ВГЧ-8 типа передача произошла только в 2 случаях. Механизм передачи во время беременности изучается. Предполагается, что ребёнок может заразиться во время родов. Вредного влияния вируса на плод пока не выявлено.

Для диагностики HHV-8 преимущественно используют серологические исследования и ПЦР. ДНК ВГЧ-8 может обнаруживаться в ткани саркомы Капоши, в мононуклеарах периферической крови. Для обнаружения антител против антигенов HHV-8 разработаны различные серологические методы, прежде всего IFA, EIA, иммуноблотинг. Некоторые сыворотки крови здоровых людей содержат антитела, которые перекрестно реагируют с антигенами HHV-8 и могут привести к ложноположительным результатам.

В крови ВГЧ-8 обнаруживают при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР). Основные показания к анализу: клиническая картина саркомы Капоши и лимфом у ВИЧ-инфицированных, дифференциальная диагностика герпес-вирусных инфекций, трансплантация органов и тканей.

ВГЧ-8 инфицирует Т- и В-лимфоциты. Он обнаруживается в клетках мочеполовой системы, в предстательной железе, сперме, слюне. При инфицировании ВГЧ-8 у 13 % лиц, перенесших трансплантацию почек, наблюдаются осложнения в виде саркомы Капоши (трансплантат-ассоциированная саркома Капоши).

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата:

  • заражение ВГЧ-8.

Причины отрицательного результата:

  • в образце цельной крови – возможное отсутствие ВГЧ-8;
  • в образце взвеси мононуклеаров, выделенных из 8-10 мл цельной крови, – однозначное отсутствие ВГЧ-8.

Что может влиять на результат?

Так как ВГЧ-8 содержится в В-лимфоцитах, при лимфопениях (менее 200 В-лимфоцитов в 1 мкл крови) в исследуемом образце крови может не оказаться инфицированных В-лимфоцитов, что даст ложноотрицательный результат ПЦР. Поэтому в подобных случаях следует исследовать взвесь лимфоцитов, выделенных из 8-10 мл цельной крови.

Важные замечания

Поскольку ВГЧ-8 реактивируется и проявляет свои патогенные свойства только у лиц с подавленной иммунной системой (ВИЧ, иммуносупрессия при трансплантациях, цитотоксическая терапия онкобольных), для оценки риска развития ВГЧ-8 – ассоциированных заболеваний и их своевременной профилактики таким пациентам следует сдавать анализ крови в целях проверки на ВГЧ-8.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Аллерголог-иммунолог, онколог, дерматовенеролог, акушер, гинеколог, инфекционист, педиатр, гематолог, хирург.

Литература

  1. Chang Y, Cesarman E, Pessin MS, Lee F, Culpepper J, Knowles DM, Moore PS. Identification of herpes-like DNA sequences in AIDS-associated Kaposi's sarcoma. Science 1994, 265: 1865-1869.
  2.  Andreoni et al,  High Seroprevalence of Antibodies to Human Herpervirus-8 in Egyptian Children, J Natl Cancer Inst V. 91, March 1999, 465
  3. Gessain A, Mauclere P, van Beveren M, Plancoulaine S, Ayouba A, Essame-Oyono JL, et al. Human herpesvirus 8 primary infection occurs during childhood in Cameroon, Africa. Int J Cancer 1999, 81:189-192.
  4. Alagiozoglou L, Sitas F, Morris L. Phylogenetic analysis of human herpesvirus-8 in South Africa and identification of a novel subgroup. J Gen Virol 2000, 81:2029-2038.
  5. Cool C.D., Rai P.R., Yeager M.E. et al. Expression of Human Herpesvirus 8 in Primary Pulmonary Hypertension // The New England Journal of Medicine September 18, 2003 (Volume 349, Number 12).
  6. Gilden DH, Mahalingam R, Cohrs RJ, Tyler KL. Herpesvirus infections of the nervous system. Nat Clin Pract Neurol. 2007 Feb;3(2):82-94.
  7. Cook-Mozaffari P, Newton R, Beral V. The geographical distribution of Kaposi's sarcoma and of lymphomas in Africa before the AIDS epidemic. BrJ Cancer 1998, 78:1521 -1528.
  8. 11. Kent A., Sepkowitz M.D. Viruses and Cancer: Finding the Links // 1999 Medscape Portals, Inc.
  9. Weiss et al, Human Herpesvirus Type 8 and Kaposi’s Sarcoma J Natl Cancer Inst, V.23, April 1997, 51-54
  10. Schulz TF. Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (human herpesvirus 8): epidemiology and pathogenesis. J Antimicrob Chemother 2000, 45 (Suppl. T3):15-27.
  11. Cook PM, Whitby D, Calabro ML, Luppi M, Kakoola DN, Hjalgrim H, et al. Variability and evolution of Kaposi's sarcoma- associated herpesvirus in Europe and Africa. AIDS 1999, 13:1163-1176.
  12. Soulier J, Grollet L, Oksenhendler E, Cacoub P, Cazals-Hatem D, Babinet P, et al. Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus-like DNA sequences in multicentric Castleman's disease. Blood 86:1276-1280.
  13. O'Brien TR, Kedes D, Ganem D, Macrae DR, Rosenberg PS, Molden J, Goedert JJ. Evidence for concurrent epidemics of human herpesvirus 8 and human immunodeficiency virus type 1 in US homosexual men: rates, risk factors, and relationship to Kaposi's sarcoma. J Infect Dis 1999, 180:1010-1017.
  14. Osmond DH, Buchbinder S, Cheng A, Graves A, Vittinghoff E, Cossen CK, et al. Prevalence of Kaposi sarcoma-associated herpesvirus infection in homosexual men at beginning of and during the HIV epidemic. JAMA 2002, 287:221 -225.
  15. Martin JN, Ganem DE, Osmond DH, Page-Shafer KA, Macrae D, Kedes DH. Sexual transmission and the natural history of human herpesvirus 8 infection. N Engl J Med 1998; 338:948-954.
  16. Cannon MJ, Dollard SC, Smith DK, Klein RS, Schuman P, Rich JD, et al. Blood-borne and sexual transmission of human herpesvirus 8 in women with or at risk for human immunodeficiency virus infection. N Engl J Med 2001, 344:637-643.
  17. Greenblatt RM, Jacobson LP, Levine AM, Melnick S, Anastos K, Cohen M, et al. Human herpesvirus 8 infection and Kaposi's sarcoma among human immunodeficiency virus-infected and uninfected women. J Infect Dis 2001, 183:1130-1134.
  18. Iscovich J, Fischbein A, Fisher-Fischbein J, Freedman LS, Eng SM, Boffetta P, et al. Seroprevalence of Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus in healthy adults in Israel. Anticancer Res 2000, 20:2119-2122.
  19. Sosa C, Benetucci J, Hanna C, Sieczkowski L, Deluchi G, Canizal AM, et al. Human herpesvirus 8 can be transmitted through blood in drug addicts. Medicina 2001, 61:291 -294.
  20. Blackbourn DJ, Lennette ET, Ambroziak J, Mourich DV, Levy JA. Human herpesvirus 8 detection in nasal secretions and saliva. J Infect Dis 1998, 177:213-216.
  21. Corey L, Brodie S, Huang ML, Koelle DM, Wald A. HHV8 infection: a model for reactivation and transmission. Rev Med Virol 2002, 12:47-63.
  22. Regamey N, Tamm M, Wernli M, Witschi A, Thiel G, Cathomas, Erb P. Transmission of human herpesvirus 8 infection from renal-transplant donors to recipients. N Engl J Med 1998, 339:1358-1363.
  23. Plancoulaine S, Abel L, van Beveren M, Tregouet DA, Joubert M, Tortevoye P, et al. Human herpesvirus 8 transmission from mother to child and between siblings in an endemic population. Lancet 2000, 356:1062-1065.
  24. Emond JP, Marcelin AG, Dorent R, Milliancourt C, Dupin N,Frances C, et al. Kaposi's sarcoma associated with previous human herpesvirus 8 infection in heart transplant recipients. J Clin Microbiol 2002, 40:2217-2219.
  25. Luppi M, Barozzi P, Rasini V, Torelli G. HHV-8 infection in the transplantation setting: a concern only for solid organ transplant patients? Leuk Lymphoma 2002, 43:517-522.
  26. Luppi M, Barozzi P, Schulz TF, Setti G, Staskus K, Trovato R, 124. et al. Bone marrow failure associated with human herpesvirus 8 infection after transplantation. N Engl J Med 2000, 343: 1378-1385.